目的:
建立子宮內膜癌裸鼠動物模型,研究基因轉染的方法和途徑及KiSS-1對子宮內膜癌轉移的抑制效果。
方法:
採用基因轉化技術,脂質體介導高純度KiSS-1質粒轉染到子宮內膜癌細胞株中。用RT-PCR和Western blot技術檢測轉染前後腫瘤細胞的KiSS-1 mRNA、MMP-9 mRNA和其蛋白metastin的表達。裸鼠分四組行體內及體外KiSS-1轉染,從分子生物學水平檢測基因表達情況,分析KiSS-1基因對活體腫瘤侵襲轉移能力的影響。
結果:
動物實驗中KiSS-1質粒轉染組較對照組KiSS-1 mRNA表達明顯增強(P<0.01);MMP-9 mRNA表達明顯減弱(P<0.01)。KiSS-1 mRNA的表達強度與pcDNA3.0-KiSS-1質粒的劑量呈正相關(r=0.95,P<0.05)。裸鼠大體解剖見對照組及空質粒轉染組部分裸鼠的肝組織及肺組織表面明顯較PcDNA-3.0-KiSS-1質粒轉染組及G418組粗糙、色暗、質硬、有粟粒狀改變KiSS-1體內、體外轉染組各項檢測差異均無統計學意義。
結論:
KiSS-1基因體內轉染方法可行,轉染率高,對細胞生物學影響與轉染劑量有明確關係,體內與體外轉染效果相若;KiSS-1基因可能參與抑制子宮內膜癌細胞的侵襲和轉移,可考慮為子宮內膜癌基因治療的一個有意義的基因。